Identyfikacja nowych immunofenotypów w przypadku alergicznej i niealergicznej astmy u dzieci

Streszczenie Wstep Astma wieku dzieciecego dzieli sie na astme alergiczną (AA) i astme niealergiczną (NA), jednak leczenie w obu przypadkach jest identyczne i tylko cześciowo skuteczne. Cel Identyfikacja nowych immunofenotypow w przypadku AA i NA u dzieci. Metody Badaniem Stowarzyszenia Badan Klinicznych nad Astmą objeto 275 niemieckich dzieci w wieku od 4 do 15 lat, ktore do tej pory nie otrzymywaly sterydow (grupa kontrolna dzieci zdrowych [HC], pacjenci z AA, pacjenci z NA). Wśrod komorek jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC) wykonano analize ilościową i funkcjonalną limfocytow T regulatorowych (Treg) i Th17 (cytometria przeplywowa/supresja komorek Treg) przed i po stymulacji przeciwcialami anty-CD3/CD28, lipidem A i peptydoglikanem. Wykonano analize regresji dla cytokin i ekspresji genow, ocenianych w analizatorze Luminex lub przy uzyciu transkryptomiki/ ilościowego PCR w czasie rzeczywistym. Do zroznicowania fenotypow uzyto liniowej analizy dyskryminacyjnej. Wyniki Za pomocą mikromacierzy i analizy bialek przy uzyciu liniowej analizy dyskryminacyjnej wyrozniono 3 fenotypy immunologiczne. U pacjentow z AA obserwowano wyzsze stezenie komorek Treg w porownaniu z grupą HC, ale nie z grupą NA. Komorki Treg w przypadku pacjentow z AA, ale nie w przypadku pacjentow z NA, istotnie hamowaly wydzielanie IL-5, IL-13 oraz IFN-γ. U pacjentow z AA obnizona byla ekspresja wewnątrzkomorkowego kanalu chlorkowego 4 (CLIC4) i stwardnienia guzowatego 1 (TSC1), waznych regulatorow odporności wrodzonej. U pacjentow z NA podwyzszony byl poziom prozapalnej IL-1β i liczba neutrofili, a odpornośc przesunieta byla w kierunku IL-17. Jednocześnie u pacjentow z NA wzmozona byla ekspresja przeciwzapalnej IL-37, bialka PSTPIP2 (bialko oddzialujące na fosfataze prolino-serynowo-treoninową 2) i związanych z neutrofilami genow CD93, receptora wyzwalającego komorek mieloidalnych 1 (TREM1) i bialka regulującego przekazywanie sygnalu przez bialko G 13 (RGS13). W przypadku obu fenotypow astmy obserwowano ograniczoną odpornośc Th2. Wnioski Zidentyfikowane nowe mechanizmy immunoregulacyjne w przypadku astmy u dzieci charakteryzowaly sie podwyzszonym poziomem komorek Treg u pacjentow z AA w porownaniu z grupą HC, ale nie w porownaniu z NA, oraz obnizonym poziomem genow wrodzonej odporności u pacjentow z AA. Pierwsza z tych cech potencjalnie wskazuje na przeciwregulacyjny mechanizm hamujący cytokiny, niewystarczający jednak do kontroli alergicznej reakcji zapalnej. U pacjentow z NA obserwowano bardzo wyraźne przesuniecie odporności w kierunku prozapalnej IL-17, promującej zapalenie neutrofilowe i obnizenie funkcjonalności komorek Treg. Identyfikacja tych unikatowych ściezek stanowi podstawe do tworzenia dalszych zindywidualizowanych strategii rozwoju astmy, przebiegu choroby i jej zapobiegania.