沉默 Fas和 PKCδ表达对游离脂肪酸诱导的 HUVEC 凋亡的影响

目的：探讨Fas与PKCδ在游离脂肪酸（ FFA）诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVEC）凋亡中的作用。方法：①取对数生长期HUVEC，分为空白组，对照组，50、75、100μmol／L FFA组及相应FFA＋PKCδsiRNA转染组，采用比色法检测细胞增殖情况，Western blot检测p-PKCδ蛋白的表达。②将HUVEC分为空白组，对照组，FFA组（100μmol／L FFA处理）和FFA＋PKCδsiRNA组，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。③取100μmol／L FFA干预后的HUVEC分别转染无关序列siRNA和Fas siRNA，以未转染细胞作空白对照，Western blot法检测p-PKCδ和Fas蛋白的表达。结果：①各组细胞增殖水平差异有统计学意义（F＝20．863，P＜0．001），FFA可抑制细胞增殖（P＜0．05），而PKCδ siRNA能减弱FFA对细胞增殖的抑制（P＜0．05）。各组细胞p-PKCδ蛋白的表达差异有统计学意义（F＝229．072，P＜0．001），FFA能提高p-PKCδ蛋白的表达水平（P＜0．05），而PKCδ siRNA可抑制FFA引起p-PKCδ蛋白的表达（P＜0．05）。②各组细胞凋亡率差异有统计学意义（F＝86．973，P＜0．001），FFA可增加细胞凋亡（P＜0．05），而PKCδ siR-NA能降低FFA所致的凋亡（P＜0．05）。③各组细胞Fas蛋白表达差异有统计学意义（F＝122．162，P＜0．001），Fas siRNA可减低HUVECFas蛋白的表达（P＜0．05）。结论：FFA诱导的HUVEC凋亡可能由PKCδ涉及的Fas通路介导。