Construction of liquichip assay for multiple human tumor markers

目的 通过建立多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统,以期达到早期发现、早期诊断肿瘤的目的,提高肿瘤的治疗效果.方法 根据Luminex公司所提供的实验流程进行荧光微球表面捕获抗体的包被,并对耦联效率和交叉反应进行鉴定,利用重组人肿瘤标志物蛋白纯品构建多指标联合检测的液相芯片的标准曲线,并与常规检查方法酶联免疫吸附实验(ELISA)进行对比.结果 鉴定结果证实抗体包被成功有效,且无交叉反应的发生;但仍应对整个流程进行严格质控,因为耦联过程中的细微差别均可导致微球表面抗体密度的较大变化,并影响后继检测效率;标准曲线构建成功,与传统"金标准"ELISA相比,液相芯片在多指标联合检测潜能、可重复性、置信区间范围、时间及试剂耗费等多方面均有明显优越性.结论 成功构建了多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统,从而为后继大规模血清样本的临床检测和肿瘤筛查奠定了基础。