Fabrication d’un réseau glomérulaire microvascularisé : néoformation d’une membrane basale glomérulaire

Introduction Dans la prise en charge de maladie renale chronique, l’atteinte glomerulaire represente 30 % des atteintes. En ce sens, l’etude de la physiologie et de la physiopathologie glomerulaire est fondamentale afin de developper des therapeutiques innovantes. Patients/Materiels et methodes Une unite glomerulaire est realisee in vitro par bioingenierie tissulaire sous forme de fibre. Une solution de cellules endotheliales glomerulaires (CE) et de collagene I est injectee dans un microcapillaire entoure d’une gaine d’alginate. La fibre liberee de sa gaine est ensuite ensemencee par des podocytes humains. La caracterisation cellulaire et matricielle a ete effectuee par immunofluorescence, Western Blot, PCR et microscopie electronique a transmission (MET). Observation/Resultats Cette fibre presente une structure tridimensionnelle sur le modele « cœur-ecorce », definie par des cellules endotheliales glomerulaires sur la couche interne et par des podocytes sur la couche externe avec la neoformation a l’interface cellulaire d’une membrane basale glomerulaire. Le maintien des caracteristiques cellulaires est confirme par l’expression du Vascular Endothelial Growth Factor Receptor (VEGFR), von Willebrand Factor (vWF) et du CD31 pour les CE, et de la synaptopodine, la nephrine pour les podocytes. A l’interface des deux types cellulaires, nous observons ainsi la synthese d’une membrane basale glomerulaire avec synthese de novo de collagene IV, de laminine et de nidogene. L’expression de ces proteines de la membrane basale est amplifiee par l’organisation tridimensionnelle. Les interactions cellulaires et l’apparition de la membrane basale glomerulaire (MBG) ont ete analysees en microscopie electronique a transmission. Une lumiere centrale est creee par laser femtoseconde. Discussion Apres creation d’une lumiere centrale, ce modele sera perfuse afin de lui appliquer des contraintes mecaniques de flux, des agents pathogenes ou pharmacologiques. Un assemblage de fibres pourra etre realise par laser afin de constituer un reseau microvascularise. Conclusion Cette structure reproduira ainsi in vitro des unites glomerulaires pour des etudes physiopathologiques.