用Ku80 siRNA 抑制Ku80 基因表达以提高肺癌细胞放射敏感性的实验研究

目的 探讨用小RNA 干扰抑制Ku80 基因表达以提高A549 肺癌细胞的放射敏感性。方法 设计并化学合成Ku80 siRNA, 转染体外培养的A549 肺癌细胞。利用RT-PCR 和Western blot分别从mRNA 和蛋白质水平对转染后的细胞Ku80 基因表达情况进行测定, 同时上述转染的细胞分别照射2、4、6、8 及10 Gy, 利用克隆形成实验测定放射敏感性的变化。结果 RT-PCR 检测显示在A549 肺癌细胞转染Ku80 siRNA 后24、48 和72 h 三个时间点Ku80 mRNA 含量减少, Western blot 分析显示在转染48 和72 h 两个时间点Ku80 蛋白含量减少, 与对照组比较有统计学差异( P lt;0. 05) 。克隆形成实验提示A549 肺癌细胞转染Ku80 siRNA 后放射敏感性增强。结论 Ku80 siRNA 转染A549 肺癌细胞后能够有效抑制Ku80 基因表达, 提高其放射敏感性。