TRAF1-DsRed真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的定位

目的构建融合蛋白TRAF1-DsRed的真核表达载体及观察TRAFl在COS-7细胞中的表达及定位。方法采用RT-PCR技术从外周血单个核细胞中扩增TRAF1cDNA，定向克隆至真核表达载体pDsRedC1，经脂质体转染COS-7细胞并以间接免疫荧光检测其在COS-7中表达。运用罗丹明123染色和激光共聚焦技术观察TRAF-1在COS-7细胞中的定位。结果转染重组子pTRAF1-DsRed的COS-7细胞可见红色荧光蛋白的表达，TRAF1在COS-7细胞中定位于线粒体。结论成功构建pTRAF1-DsRed融合基因并进行真核表达，确定TRAF-1在COS-7细胞中的定位，为进一步研究有关TRAF1的信号传导通路奠定了基础。