INCREASING THE YIELD OF EIMERIA TENELLA OOCYSTS IN PRIMARY CHICKEN KIDNEY CELLS

SUMMARY. The present study was undertaken to increase the yield of Eimeria tenella oocysts in primary chicken kidney cells (PCKCs) using a comparatively inexpensive cellculture system. PCKCs growing on coverslips positioned on the bottoms of individual wells in 24-well tissue-culture plates were infected with sporozoites of E. tenella. The effects of changing the culture medium (RPMI 1640), medium pH, serum type, and serum concentration in the wells were determined by counting newly produced oocysts at 7 days postinoculation. There were significantly more (P < 0.01) oocysts produced when the medium was supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and changed either daily or every other day compared with not changing the medium. When the same medium was changed daily, significantly more (P < 0.05) oocysts were produced at pH 7.4 than at pH 8.0 but not at pH 6.0. If the medium was changed daily, significantly more (P < 0.05) oocysts were produced when medium was supplemented with 10% FBS only rather than 5% and 10% chicken serum. The cell-culture system described in this study offers a convenient and efficient method for investigating the biological, biochemical, and immunological relationships between E. tenella and the host cell. RESUMEN. Incremento en la produccion de oocistos de Eimeria tenella en celulas primarias de rifion de polio. Este estudio fue realizado para incrementar la producci6n de oocistos de Eimeria tenella en celulas primarias de rifi6n de pollo, usando un sistema de cultivo celular comparativamente mas barato. Las celulas de rifi6n de polio crecieron sobre laminillas cubreobjetos que se colocaron en el fondo de cada una de las 24 celdillas de una placa de cultivo celular que se infect6 con esporozoitos de E. tenella. Los efectos de los cambios en el medio de cultivo (RPMI 1640), pH del medio, y tipo y concentraci6n del suero, fueron determinados por los recuentos de oocistos producidos a los 7 dias despues de la inoculaci6n. Se encontro una producci6n significantemente mayor de oocistos (P < 0.01) cuando el medio de cultivo fue suplementado con 10% de suero fetal bovino y fue cambiado diariamente o en dias alternos, comparado con la producci6n cuando no se cambi6 el medio. Cuando el mismo medio fue cambiado diariamente, se produjo un numero significantemente mayor de oocistos (P < 0.05) a un pH de 7.0 que a uno de 8.0, pero no a un pH de 6.0. Cuando el medio se cambio diariamente, se produjo un numero significantemente mayor (P < 0.05) de oocistos cuando el medio se suplement6 uinicamente con 10% de suero fetal bovino en vez de suero de polio al 5% o 10%. El sistema del cultivo celular que se describe ofrece un metodo conveniente y eficaz para la investigacion de las relaciones biologicas, bioquimicas e inmunoquimicas entre la E. tenella y la celula huesped.