Metoda RNAscope® pro analýzu exprese HER2 ve vzorcích karcinomů mléčné žlázy s neprokázanou amplifikací

Pokud je u pacientek s invazivnim karcinomem prsu prokazana nadměrna exprese transmembranoveho proteinu HER2/c-erbB2/neu (dale jen HER2) nebo amplifikace jeho genu, je indikovana cilena lecba humanizovanou monoklonalni protilatkou trastuzumab (Herceptin™). Nově se ve světě zacina testovat metoda detekce mRNA proteinu HER2, založena na RNA in situ hybridizaci (RNAscope®). Metoda by mohla přispět ke zpřesněni diagnostiky zejmena v situacich, kdy obě standardni metody vedou k hranicně pozitivnim výsledkům nebo jsou tyto výsledky diskrepantni. Cilem nasi prace byla optimalizace RNAscope® metody a jeji otestovani na souboru tkaňových vzorků s diskrepantnimi výsledky (nadměrna exprese proteinu HER2, neprokazana amplifikace genu HER2). Do pilotni studie bylo dosud zařazeno celkem 10 připadů. U větsiny z nich byla nalezena vysoka pozitivita signalu HER2 mRNA korelujici s nadměrnou expresi proteinu HER2. Metoda RNAscope® by mohla být do budoucna dobrým pomocnikem. Je vysoce senzitivni a specificka, navic oproti fluorescencni in situ hybridizaci (FISH) hodnotitelna běžným světelným mikroskopem, kde lze celkovou pozitivitu signalu hodnotit v kontextu morfologie konkretniho preparatu. Nevýhodou metody je zatim vysoka casova a financni narocnost. Dalsim cilem byla analýza frekvence výskytu nehodnotitelných vzorků z důvodů nedostatecne hybridizace v souboru 545 karcinomů prsu vysetřených v nasi laboratoři v roce 2011. Celkový podil nevyhodnotitelných vzorků vysetřovaných v nasi laboratoři (1,3 %) odpovida udajům uvaděným v literatuře. HercepTest™ nebylo možne vyhodnotit v 1,7 % připadů, FISH v 16 % připadů.