IL-1RA-PEP融合蛋白的构建及其对脑缺血再灌注后细胞凋亡的抑制作用研究

目的构建白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1RA）与细胞渗透肽（PEP-1）融合蛋白,探讨其对脑缺血再灌注（I/R）后神经细胞凋亡的抑制作用。方法构建IL-1RA与PEP-1融合基因,通过诱导表达和分离纯化,制备IL-1RA-PEP融合蛋白。建立大鼠大脑中动脉阻断模型（MCAo）,形成I/R损伤,静脉注射IL-1RA-PEP,24 h后检测其在大鼠脑组织的分布,以及脑组织梗死体积,炎性细胞浸润和神经细胞凋亡情况,并分析相关凋亡蛋白的表达变化。结果 IL-1RA-PEP融合蛋白具有拮抗IL-1的生物学活性,其能有效地渗透进入I/R大鼠脑组织。给药24 h后,缺血半球脑梗死体积和神经细胞凋亡数量减少,胱天蛋白酶（caspase）3和9等凋亡蛋白表达水平下降,同时Bcl-x L抗凋亡蛋白表达水平升高。结论 IL-1RA-PEP融合蛋白能有效地渗透I/R大鼠脑组织,通过对相关凋亡蛋白的调控,抑制了I/R后脑组织神经细胞凋亡,对I/R损伤具有治疗作用。