Papel del receptor p2x4 en la muerte microglial inducida por activación

El objetivo general de este trabajo de Tesis Doctoral ha sido estudiar el papel de la senalizacion purinergica, en particular la senalizacion mediada por el receptor P2X4, en el proceso de activacion microglial tanto en modelos celulares in vitro como en modelos animales in vivo.Para ello nos propusimos los siguientes objetivos especificos:1.Caracterizar la expresion de los receptores purinergicos, en particular del receptor P2X4, en la microglia in vitro e in vivo, en condiciones basales y de activacion.2.Analizar si el bloqueo del receptor P2X4 inhibe el proceso de activacion microglial in vitro.3.Analizar la muerte microglial inducida por su activacion con LPS y el efecto de antagonistas de receptores purinergicos sobre dicha muerte.4.Estudiar el comportamiento de la microglia in vivo, en condiciones patologicas de neuroinflamacion y en el modelo animal de la esclerosis multiple.5.Estudiar el efecto del TNP-ATP y la ivermectina, antagonista y potenciador del receptor P2X4 respectivamente, sobre el comportamiento de la microglia in vivo.En su conjunto, en este estudio hemos demostrado que la activacion microglial con LPS y la que tiene lugar en la esclerosis multiple induce una sobreexpresion del receptor P2X4, y que dicha sobreexpresion regula funciones microgliales como la retraccion de procesos y cambio morfologico, la movilidad de la misma, la liberacion de citoquinas como el TNFa y la muerte microglial. La interferencia en dichos procesos, tanto de la activacion, de la muerte microglial o de ambos, mediante el bloqueo del receptor P2X4 con TNP-ATP exacerba el cuadro neurologico en la EAE, modelo animal de la esclerosis multiple. Por el contrario, la potenciacion del receptor P2X4 con ivermectina atenua el deterioro neurologico en la EAE. Estos resultados sugieren que la modulacion de la activacion microglial mediada por P2X4 podria tener un papel beneficioso o reparador en el desarrollo de dicha patologia.