南极独角雪冰鱼 HSP90β 基因cDNA序列克隆及其原核表达

为研究南极鱼类HSP90β蛋白与低温适应的相关性,本研究克隆获得了南极独角雪冰鱼( Chionodraco hamatus ,CH)热休克蛋白 HSP90β 基因的完整开放阅读框,并以尼罗罗非鱼( Oreochromis niloticus, ON)HSP90β蛋白为对照,进行低温胁迫下的原核表达研究。结果表明:克隆获得的独角雪冰鱼 HSP90β 基因编码区全长为2 184 bp,推定编码728个氨基酸。多重序列比对显示,独角雪冰鱼HSP90β与其他鱼类HSP90β的氨基酸序列同源性在87%以上;蛋白结构域分析发现,独角雪冰鱼HSP90β具有HSP90家族的保守信号区,其重要功能位点的氨基酸残基非常保守。构建pET28-CH- HSP90β 和pET28-ON- HSP90β 重组表达载体,观察4 ℃低温胁迫8 h和12 h后,HSP90β蛋白对大肠杆菌生存能力的影响。结果显示: C. hamatus - HSP90β 组的大肠杆菌存活率显著高于 O.niloticus - HSP90β 组和空载体pET28a对照组,这表明南极冰鱼HSP90β在低温条件下具有更加显著的细胞保护功能。由此推测HSP90β蛋白参与了南极冰鱼低温适应的生理过程。