Kutatások a MALDI-TOF tömegspektrometria szénhidrátkémia alkalmazási lehetőségeinek kiszélesítésére = Investigation of widening of the MALDI-TOF MS applications in carbohydrate chemistry

A kutatas fő celkitűzese volt szenhidratok es szarmazekaik (vedőcsoportokat tartalmazo vagy feherjehez kotott oligoszacharidok) MALDI-TOF tomegspektrometrias meghatarozasahoz optimalis kiserleti korulmenyek megallapitasa es igy a szenhidratkemiai kutatasok segitese. Ciklodextrin modellvegyuletek alkalmazasaval vizsgaltuk a minta előkeszites es felvitel valamint a kiserleti parameterek valtoztatasanak hatasat a spektrumra. Tanulmanyozzuk a matrix anyaganak, a minta koncentraciojanak, a mintafelvitel modjanak es a reflektron detektor erzekenyseg hatasat a spektrum minősegere. Vedőcsoportokat tartalmazo oligoszacharidok meresekor szamos torvenyszerűseget figyeltunk meg a vedőcsoportok stabilitasa, a kulonboző matrixok es kiserleti parameterek kozott. A MALDI meresek segitettek a termekek es mellektermekek azonositasat kemiai es enzimes oligoszacharid szintezisek eseteben. Fragmentacios vizsgalatokkal kemiai es enzimatikus szintezissel előallitott oligoszacharidok, valamint termeszetes eredetű amilaz inhibitorok szerkezet felderiteset vegeztuk el. Meghataroztuk kulonboző neoglikoproteinek oligoszacharid tartalmat, amely meghatarozo a sikeres immunvalasz kivaltasaban. Mereseinkkel tamogattuk a kulonboző neoglikoprotein előallitasi modszerek szisztematikus vizsgalatat. | The object of this research program was the application of MALDI-TOF MS in the field of carbohydrates and glycoconjugates. Cyclodextrins as model compounds were used to investigate the effect of the sample preparation methods and experimental parameters on the spectrum. The studied experimental parameters were: different matrix compounds, detector sensitivity, sample concentration and sample preparation methods. The stability of the protecting groups under the conditions of the evaporation/ionization was studied. The MALDI measurements assisted to identify products and byproducts of different chemical and enzymatic oligosaccharide syntheses (eg. sugar-sulfonates, sulfonic acid esters, PNP-glycosides and acarbose derivatives). Structural analysis and verification were made using post source decay fragmentation method in case of a tetrasaccharid component of N-glycanes, acarbose and its derivatives obtained by enzymatic synthesis and some natural alpha-amylase inhibitors. In addition we used this method for determination of molecular masses of neoglycoproteins.