A influência da saliva do vetor Lutzomyia longipalpis na infecção de macrófagos por Leishmania infantum chagasi

A transmissao do protozoario do genero Leishmania ocorre durante o repasto sanguineo realizado por femeas de flebotomineos infectadas, atraves do inoculo do parasita juntamente com a saliva na pele do hospedeiro vertebrado. A saliva do vetor possui proteinas com acao vasodilatadora, anticoagulante e quimiotatica, que atuam diretamente no sistema imunologico do mamifero. Pressupoe-se assim que a mesma possa exercer influencia em etapas distintas durante todo o curso da infeccao. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influencia da saliva do vetor Lutzomyia longipalpis em diferentes momentos da infeccao de macrofagos murinos de linhagem RAW 264.7 por Leishmania infantum chagasi, causador da leishmaniose visceral. Para tanto, os flebotomineos foram coletados e apenas as femeas nao ingurgitadas foram utilizadas. As glândulas salivares foram extraidas e colocadas em PBS (Phosphate Buffered Saline) esteril, sonicadas, centrifugadas e os sobrenadantes (incluindo a saliva) foram conservados a -80oC. Para os ensaios in vitro, os macrofagos RAW 264.7 foram cultivados em chamber slides e estimulados em diferentes momentos: antes, durante e pos infeccao com L. infantum chagasi na proporcao de 10 parasitos por macrofago. Em seguida as chamber slides foram acondicionadas em estufa a 5% de CO2 a 37ᵒC por 48 horas. Nossos achados mostram que os grupos estimulados com saliva antes e durante a infeccao apresentaram maior numero de macrofagos parasitados em relacao ao controle. Verificou-se que os macrofagos estimulados em todos os momentos apresentaram producao aumentada de oxido nitrico nos sobrenadantes das culturas, em especial no grupo durante a infeccao. Em relacao a producao de citocinas, TNF-α foi detectada nos grupos com estimulos antes e durante a infeccao, entretanto o grupo antes da infeccao produziu mais IL-6 em comparacao aos demais. Alem destes resultados, destacamos que a saliva ainda influencia na proliferacao e possivel infectividade do parasito. Portanto, a saliva modula tanto a resposta imune dos macrofagos como potencializa a infeccao pela Leishmania, sendo essencial para a sua manutencao.