hPDGF-A／hBD2双基因共表达腺病毒载体的构建及表达

目的制备人血小板源性生长因子-A（human platelet-derived growth factor A,hPDGF-A）和人β防御素2（human beta defensins,hBD2）双基因共表达腺病毒载体并观察其在大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）中的表达。方法将hPDGF-A和hBD2通过内部核糖体插入位点（internal ribosome entry site,IRES）连接后,以同源重组的形式插入腺病毒表达载体,由人胚肾293细胞包装,获得有感染能力的重组腺病毒颗粒。重组病毒感染BMSCs后,用RT-PCR检测重组腺病毒的表达。结果①成功构建穿梭质粒pAdTrack-hPDGF-A-IRES2-hBD2。②成功构建重组腺病毒质粒pAdeasy-hPDGF-A-IRES2-hBD2。③293细胞包装获得有感染能力的重组腺病毒。④转染的BMSCs高表达hPDGF-A和hBD。结论构建了hPDGF-A/hBD双基因共表达腺病毒载体,证实其转染BMSC后的表达。