pGEX-5X-1-hLMO4原核质粒构建及重组蛋白表达

目的：构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法：hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷（IPTG）在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione Sepharose 4B纯化诱导的融合蛋白,并经Western blot鉴定结果。结果：hLMO4编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在E.coli BL21中IPTG诱导融合蛋白的表达,分子质量约为49 000 Da,成功纯化出GST及GST-hLMO4蛋白,Western blot检测到蛋白表达。结论：构建了hLMO4基因原核表达载体,鉴定了GST-hLMO4融合蛋白表达。