Estimation and application of uncertainty of measurement in detecting of hepatitis B virus DNA by method of fluorescence quantitative polymerase chain reaction

目的 对荧光定量PCR(FQ-PCR)测定HBV DNA测量不确定度进行评定,并探讨其应用价值.方法 通过对FQ-PCR检测HBV DNA测量过程的分析,确定并简化测量不确定度的来源;采用不确定度A类评定方法以及不确定度B类评定方法,量化各不确定度分量;确定合成不确定度与扩展不确定度.结果 测量不确定度来源主要有:批内重复性、批间重复性和方法偏倚等因素.FQ-PCR测定HBV DNA的扩展不确定度U=0.62(k=1.96,n=2);在各不确定度分量中,由方法偏倚导致的不确定度所占比重最大.结论 FQ-PCR测定HBV DNA引入扩展不确定度使结果具有可比性,同时可作为乙型肝炎患者抗病毒治疗疗效判断和质控物浓度选择的依据。