Etude de l'impact fonctionnel des modifications post-traductionnelles dans l'activation de l'inflammasome NLRP3

L'inflammation est un processus declenche suite a la detection de pathogenes et de dommages tissulaires. Elle conduit a la secretion de cytokines pro-inflammatoires par les cellules immunitaires innees ainsi qu'au declenchement de la pyroptose, mort cellulaire pro-inflammatoire. NLRP3 est une proteine senseur de stress cellulaire regulant le declenchement de ces processus via la formation d'une plateforme multiproteique appelee inflammasome. L'activation non controllee de NLRP3 conduit au developpement d'une maladie auto-inflammatoire appelee CAPS (Cryopyrin associated periodic syndrome). De plus, l'inflammasome est implique dans le developpement et la severite des symptomes de nombreuses maladies multifactorielles (diabete de type 2, atherosclerose, maladie de Parkinson et d'Alzheimer, sclerose en plaques, cancers...). Les mecanismes regulant l'activation de NLRP3 ne sont pas encore compris, mais les modifications post-traductionnelles de NLRP3 sont impliquees dans ce processus. Notre laboratoire a identifie differents sites d'ubiquitination et de phosphorylation sur NLRP3 par des approches biochimiques. Via la creation de lignees cellulaires NLRP3 knock out reconstituees pour exprimer NLRP3 mute sur les residus precedemment identifies et de souris NLRP3 knock-in par la technique de CRISPR/Cas9, le travail de these a consiste en l'etude de l'impact fonctionnel de ces modifications. Ces resultats montrent que les substitutions de deux lysines identifiees comme etant ubiquitinees conduisent a une deregulation de l’activation de l'inflammasome NLRP3 dans les cellules primaires. Un nouveau point de controle de l'activation de NLRP3 a ainsi pu etre mis en lumiere.