Stimulation of Protein Synthesis in Pachytene Primary Spermatocytes from the Human Testis by Pyruvate

Summary:  A sequential enzymatic incubation in collagenase and trypsin was carried out to yield a suspension of viable single cells from the seminiferous epithelium of adult human testis. The cell suspension predominantly consisted of pachytene primary spermatocytes (15%), round spermatids (32%), and condensing spermatids and residual bodies (21%). Human pachytene spermatocytes were isolated by unit gravity sedimentation using the methods originally developed for murine tissue. The spermatocyte-enriched fraction was 79% pure. When the effect of energy sources on protein synthesis by spermatocytes was examined, the highest rate of protein synthesis with pyruvate was found among four kinds of substrates added at a concentration of 10 mM. As shown with murine spermatocytes, the rate of protein synthesis by the human spermatocytes is probably regulated by pyruvate. Zusammenfassung:  Aufeinanderfolgende enzymatische Inkubation in Kollagenase und Trypsin wurde durchgefuhrt, um als Ertrag eine Suspension mit lebensfahigen einzelnen Zellen des Tubuli seminiferi-Epithels von Hoden erwachsener Manner zu liefern. Die Zellsuspension enthielt vorherrschend Fruhspermatozyten im Pachytan (15%), Rundspermatiden (32%), Spermatiden im Kondensationsstadium und Residualkorperchen (21%). Menschliche Spermatozyten im Pachytan wurden durch einheitliche Schwerkraftsedimentation unter Anwendung der Originalmethode isoliert, die fur Rattengewebe entwickelt wurde. Die Fraktion, die mit Spermatozyten angereichert wurde, hatte einen Reinheitsgrad von 79%. Als die Wirkung der ursachlichen Energiequelle untersucht wurde, ergab sich der hochste Grad der Pyruvat-Proteinsynthese unter vier Substratarten bei einer Konzentration von 10 mMol. Wie schon bei Rattenspermatozyten gezeigt werden konnte, ist der Grad der Proteinsynthese menschlicher Spermatozyten moglicherweise durch Pyruvat reguliert.