microRNA-7基因敲减对小鼠CD4^+SP细胞胸腺发育的影响

2015 
目的:研究microRNA-7( miRNA-7,miR-7)基因敲减对小鼠CD4^+SP细胞胸腺发育的影响。方法:检测miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)和野生型(Wild-type,WT)小鼠胸腺重量及细胞总数变化;HE染色观察miR-7KD小鼠胸腺的形态学结构改变;FACS检测胸腺CD4^+单阳性(Single positive,SP)细胞的比例并计算细胞总数,同时检测CD4^+SP细胞CD44及CD62L表达变化;核抗原Ki-67染色法检测CD4^+SP细胞的增殖情况;FACS检测CD4^+SP细胞的凋亡变化;Western blot 技术检测胸腺中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2表达水平变化。结果:与WT小鼠相比,miR-7KD小鼠胸腺体积、重量以及细胞总数均显著减少,且形态学结构发生改变( P<0.05);FACS结果显示,miR-7KD小鼠胸腺CD4^+SP细胞比例明显降低,且细胞总数减少( P<0.05)。此外,CD4^+SP细胞的CD44表达水平显著增加,而CD62 L表达水平明显减少( P<0.05);同时,CD4^+SP细胞增殖及凋亡比例均显著增加(P<0.01);最后,miR-7KD小鼠胸腺中ERK1/2以及磷酸化ERK1/2的表达均明显下调( P<0.05)。结论:miR-7基因敲减后可显著影响CD4^+SP细胞的胸腺发育,这可能与细胞活化水平及ERK1/2信号通路改变有关。
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