HPLC/DAD/MS法测定盐酸昂丹司琼及其3种微量杂质

目的：建立HPLC/DAD/MS法同时测定盐酸昂丹司琼及其3种微量杂质,即1,2,3,4-四氢-9-甲基-4H-咔唑酮（中间体Ⅰ）、9-甲基-3-（二甲胺基）甲基-1,2,3,9-四氢-4H-咔唑-4-酮盐酸盐（中间体Ⅱ）、1,2,3,9-四氢-9-甲基-3-亚甲咔唑酮（杂质Ⅲ）。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱：Allsphere Cyano（CN）柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相：乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氢钠水溶液（用1mol·L-1氢氧化钠调节pH5.4）梯度洗脱,梯度条件如下：0.01min,25∶75;10.0min,75∶25;15.0min,75∶25;15.10min,25∶75;20.0min,25∶75;流速：1mL·min-1;柱温：25℃;进样量：10μL,检测波长248nm,离子源：ESI,扫描模式正离子。结果：盐酸昂丹司琼、中间体Ⅰ、中间体Ⅱ、杂质Ⅲ的线性范围分别为：0.01～2.53μg（r=0.9999）,0.01～2.52μg（r=0.9999）,0.01～2.53μg（r=0.9999）,0.01～2.48μg（r=0.9999）;最低检测限分别为0.125,0.125,0.25,0.125ng;定量限分别0.375,0.375,0.75,0.375ng。结论：盐酸昂丹司琼及其3种微量杂质分离良好;其原料药中检出杂质Ⅲ,含量为0.10%。该方法简单、准确、可靠、重现性好,可以作为盐酸昂丹司琼及其3种可能的微量杂质的质量控制方法。