Glycovecteurs pour le ciblage thérapeutique d'une maladie rare lysosomale : la maladie de Pompe

Sur la cinquantaine de maladies rares lysosomales, seules 8 peuvent etre traitees par enzymotherapie substitutive avec plus ou moins d’efficacite. Il y a donc un reel besoin de developper de nouveaux traitements mais aussi de mieux caracteriser les causes de ces maladies. Durant cette these nous nous sommes interesses a la maladie de Pompe qui resulte de l’absence ou de la carence en enzyme lysosomale alpha-glucosidase acide (GAA) responsable de la degradation du glycogene en glucose dans de nombreux tissus. Actuellement seule la forme infantile de cette maladie peut etre traitee alors que la forme juvenile/adulte est faiblement amelioree par le traitement Myozyme®. Cette these a eu pour but de developper une nouvelle enzymotherapie qui, a terme, permettrait d’empecher la progression de la maladie et de soigner, de maniere satisfaisante, les formes juveniles et adultes de la maladie de Pompe. Dans ce but, nous avons utilise des derives monosaccharidiques « Analogues du Mannose-6-phosphate (M6P) Fonctionnalises sur l’Aglycone (AMFA) », qui sont ensuite greffes sur la GAA recombinante humaine (rhGAA) afin d’ameliorer son adressage aux lysosomes obtenant la rhGAA-AMFA.Une premiere etude in vitro, sur des fibroblastes de patients atteints de la forme adulte de la maladie, a demontre que le greffage des AMFA sur la rhGAA produite en cellules d’insectes Sf9 ameliorait significativement l’affinite pour le recepteur du M6P (RM6P), l’internalisation et l’activite de l’enzyme et lui conferait une efficacite sur les souris GAA-/-, modeles de la maladie de Pompe, par rapport au traitement actuel (Article 1). Puis nous avons pu demontrer, pour la premiere fois, l’efficacite de la rhGAA-AMFA produite en cellules CHO sur des souris GAA-/- âgees. Ces resultats suggerent, ainsi, la possibilite d’utiliser cette neo-enzyme dans le traitement de la forme adulte de la maladie (Article2). Enfin, le greffage des AMFA permet d’obtenir une maturation intracellulaire complete de la rhGAA sous forme active dans des myoblastes et myotubes de patients adultes et dans les quadriceps de souris âgees modeles Pompe, ce qui n’a pas ete observe pour Myozyme® (Article 3). Lors de cette these, nous avons egalement demontre que de nouveaux analogues disaccharidiques, ayant une meilleure affinite que les monosaccharides pour le RM6P, peuvent efficacement cibler la rhGAA pour le traitement de la maladie de Pompe. Un brevet a ete depose sur ces resultats (Brevet PCT/FR2016/052339).En conclusion, ce travail a permis de developper une nouvelle technologie de ciblage plus efficace des enzymes lysosomales par des analogues synthetiques. La designation de medicament orphelin pour l’alpha glucosidase acide conjuguee aux analogues du mannose-6-phosphate a ete obtenue suite a ces travaux aupres de l’Agence Europeenne du Medicament pour le traitement de la maladie de Pompe (EMA/OD/098/16).Mots cles: maladies lysosomales, maladie de Pompe, enzymotherapie, recepteur du mannose 6-phosphate