DLX4 RNAi抑制绒癌细胞黏附、侵袭能力的实验研究

背景与目的：绒毛膜癌是一种高度恶性的肿瘤，早期即可发生远处侵袭转移，但其机制目前尚不明确。DLX4是新近发现的同源异型盒转录因子，其异常表达与乳腺癌、结肠癌等多种肿瘤密切相关。本实验拟在既往发现DLX4在绒癌细胞株JEG-3中呈现高表达的基础上，通过RNA干扰（RNA interference，RNAi）抑制JEG-3中DLX4的表达，探讨DLX4对绒癌细胞黏附、运动及侵袭能力的影响。方法：构建DLX4特异性的siRNA和阴性对照siRNA，脂质体转染绒癌JEG-3细胞，G418抗性筛选高表达阳性克隆；Western blot检测RNAi效果；分别用细胞．基质黏附实验、Transwell小室和Matrigel基质侵袭实验检测细胞黏附、运动和侵袭能力的变化。结果：DLX4 siRNA特异并有效的抑制了JEG-3细胞中DLX4的表达；转染DLX4 siRNA组（JEG-3 siDLX4）的细胞与细胞外基质的黏附率为（30．6±4．2）％，显著低于未转染组（JEG-3 nontransfection）的（57．2±4．0）％和转染了阴性对照siRNA组（JEG-3 scDLX4）的（51．6±3．9）％（分别为P〈0．01和P〈0．05）；体外细胞运动和侵袭实验结果显示，JEG-3 siDLX4组的穿膜细胞数分别为（31±3）和（21±4）个／高倍镜，显著低于JEG-3 nontransfection组的（68±5）和（64±4）个／高倍镜以及JEG-3 siDLX4组的（70±4）和（67±5）个／高倍镜（P〈0．01），而后两组细胞间黏附、运动和侵袭能力方面差异均无显著性（P〉0．05）。结论：RNAi阻断DLX4的表达，能够抑制绒癌细胞的黏附侵袭能力，为进一步研究绒癌侵袭转移的机制提供了思路。