镉对蛋白磷酸酶2A-B55δ高表达L02细胞周期和核因子-κB活化影响

目的探讨镉对蛋白磷酸酶2A（PP2A）的B55δ亚基高表达和不同多态性单体型调控高表达的肝细胞周期的影响及其与核因子．kappaB（NF—KB）活化的关系。方法选择永生化人正常肝L02细胞，采用B55δ编码基因PPP2艘D序列构建高表达的L02-2R2Dc细胞、与不同启动子区单体型调控高表达的L02—2R2D—PCI和L02-2R2D—PC3细胞株，以导入空载体的L02-pBabe为对照细胞。各细胞给予5～80umol／L的氯化镉（CdCl2）处理建立细胞模型。噻唑蓝法检测各细胞生长的抑制作用；流式细胞术检测细胞周期；蛋白免疫印迹（Westernblotting）检测细胞核内NF—KBp65蛋白的活化情况；荧光定量聚合酶链反应（QRT—PCR）检测环氧合酶-2（COX-2）基因mRNA水平的改变。结果与对照组比较，CdCl2组各细胞的增殖抑制率随镉水平增高呈剂量依赖性增高（Pearson’s r均P〈0．05）；与CdCl2组比较，冈田酸＋CdCl2组各细胞的增殖抑制率明显增加（P〈0．05）；与对照组比较，CdCl2组细胞G，期比例下降、S期比例增加（P〈0．05）；胞核p65蛋白水平增高，COX-2mRNA水平上调；这种效应在不同细胞株之间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论镉可引起PP2A-B55δ高表达的人肝L02细胞增殖功能抑制并导致细胞周期s期阻滞，这种效应与NF—KB信号通路的活化有关。