OPTIMIZACIÓN EN LA RECUPERACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS COMO MOLÉCULA ENTERA Y FRAGMENTO F(ab´)2 EN LA PRODUCCIÓN DE ANTIVENENOS

En la actualidad se utilizan, principalmente, dos metodos de purificacion  de anticuerpos a partir de plasmas equinos hiperinmunes para la produccion de antivenenos a nivel industrial, obteniendose preparaciones enriquecidas en moleculas de inmunoglobulinas G o fragmentos F(ab´) 2 . Con ambos metodos, luego de la precipitacion, se observa una importante perdida de capacidad neutralizante en comparacion con la capacidad neutralizante de los plasmas de partida. En este trabajo, se realizo el fraccionamiento de plasmas equinos hiperinmunes utilizando acido caprilico con y sin digestion enzimatica con pepsina. El objetivo es explicar el porcentaje de recuperacion de la capacidad neutralizante luego del fraccionamiento; siendo este  menor cuando el plasma fue tratado enzimaticamente. Adicionalmente, se pretende establecer cual es la etapa responsable en la diferencia de la recuperacion de anticuerpos entre una metodologia y otra. Cuando  se purificaron las inmunoglobulinas enteras, se recupero aproximadamente un 53% de la capacidad neutralizante mientras que cuando la muestra se purifico luego de  ser tratada enzimaticamente se obtuvo alrededor del 30% de esa actividad. Una relacion de similar magnitud se verifica en la recuperacion de la masa de proteinas solubles luego de remover los contaminantes, entre una metodologia y otra. La insolubilizacion del fragmento Fc generado durante la digestion seria el responsable de esa perdida adicional de proteina y capacidad neutralizante.