Response Surface Methodology (RSM) for analysing culture conditions of Acidocella facilis strain USBA-GBX-505 and Partial Purification and Biochemical Characterization of Lipase 505 LIP

Por medio de la Metodologia de Respuesta de Superficie (RSM) evaluamos las condiciones de cultivo (fuente de N, fuente de C, pH y tasa de agitacion) que incrementan la biomasa de Acidocella facilis cepa USBA-GBX-505 y, como consecuencia, la produccion de su enzima lipolitica, llamada 505 LIP. Los resultados de la RSM revelaron que el extracto de levadura y la agitacion fueron factores de cultivo claves, que incrementaron de 4 a 5 veces la actividad lipolitica asociada al crecimiento (de 0.13 U.mg-1 a 0.6 U.mg-1). La lipasa 505 LIP se purifico parcialmente usando cromatografia de exclusion por tamano y cromatografia de intercambio ionico. Su peso molecular fue > 77 kDa. La enzima muestra su actividad catalitica optima a 55 °C y pH 7.5. El EDTA, el PMSF, el 1-butanol y el DMSO inhibieron la actividad enzimatica, mientras que el Tween 20, la acetona, el glicerol y el metanol la incrementaron. La enzima 505 LIP no requiere iones metalicos para su actividad, e incluso se inhibe en presencia de ellos. Este estudio muestra el uso potencial de A. facilis cepa USBA-GBX-505 para la produccion de una nueva enzima lipolitica, 505 LIP, que es estable a temperaturas moderadas y en la presencia de solventes organicos. Estas son caracteristicas importantes en la sintesis de muchos productos utiles.