Effect of chemokine CXCL12 and its receptor CXCR4 on proliferation, migration and invasion of epithelial ovarian cancer cells

目的 探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 采用RT-PCR技术和免疫细胞化学染色法检测卵巢癌细胞株CAOV3细胞中CXCL12、CXCR4 mRNA和蛋白的表达,以及CXCL12(100 ng/ml)作用后CAOV3细胞中整合素β1和血管内皮生长因子C(VEGF-C)mRNA的表达.实验分为6组:对照组(未加药),实验组1(加100 ng/ml的CXCL12),实验组2(加10 ng/ml的CXCL12),实验组3(加100 ng/ml的CXCL12和10μg/ml的CXCR4抗体),实验组4(加100 ng/ml的CXCL12和1μg/ml的CXCR4拮抗剂--AMD3100),实验组5(加10μg/ml的CXCR4抗体或卵巢癌腹水).采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测CXCL12对CAOV3细胞增殖的影响.以穿膜小室为模型,采用重组细胞基底膜迁移、侵袭实验检测CXCL12和卵巢癌腹水对CAOV3细胞迁移、侵袭的影响.结果 CAOV3细胞中,CXCR4蛋白呈棕黄色强阳性表达,CXCR4 mRNA的表达水平为0.70±0.10,经100 ng/ml的CXCL12作用24h时CXCR4mRNA的表达水平(1.24±0.14)显著增加(t=-7.1088,P=0.0021);CXCL12蛋白和mRNA均无表达.100 ng/ml的CXCL12作用3 h时整合素β1 mRNA表达水平即显著增加(作用前后分别为0.53±0.10、1.53±0.16,P＜0.01),24 h时VEGF-C mRNA表达水平显著增加(作用前后分别为0.52±0.09、1.11±0.15,P＜0.01).对CAOV3细胞的增殖作用,实验组1分别与对照组和实验组2比较均明显增强(3组分别为0.428±0.051、0.325±0.045、0.328±0.039,P＜0.05);实验组1分别与实验组3和实验组4比较均明显被抑制(后两组分别为0.356±0.031、0.373±0.029,P＜0.05);而实验组5(0.349±0.038)与对照组比较,差异则无统计学意义(P＞0.05).对CAOV3细胞的迁移和侵袭作用,实验组1分别与对照组和实验组2比较均明显增强[迁移细胞数分别为(523.3±25.2)、(108.0±7.2)、(211.7±24.7)个,侵袭细胞数分别为(39.3±4.0)、(4.0±1.0)、(15.7±3.1)个;P均＜0.01];实验组1分别与实验组3和实验组4比较均明显被抑制(P＜0.05);但实验组5[即加入卵巢癌腹水组;迁移细胞数为(706.6±30.6)个,侵袭细胞数为(61.7±7.6)个]显著多于实验组1(P＜0.05).结论 CXCL12可促进卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭,并上调整合素β1和VEGF-C mRNA的表达,此作用可被CXCR4抗体抑制,表明CXCL12在卵巢癌的生长和转移中发挥一定作用。