L’hème, un nouveau ligand du récepteur des produits de glycation avancée (RAGE)

Introduction Le syndrome hemolytique et uremique atypique (SHUa) est une microangiopathie thrombotique renale caracterisee par une hemolyse mecanique et une suractivation du complement. Il est demontre que l’heme, derive de l’hemolyse, lie C3a, amplifiant ainsi l’activation du complement. Les mecanismes d’action du complexe heme-C3a sont inconnus. Une interaction du C3a avec le Recepteur aux produits de glycation avancee (RAGE) est rapportee. RAGE, recepteur multi-ligands ubiquitaire, est implique dans differentes pathologies a tropisme renal (nephropathie diabetique, lupique, polykystose) mais aucun role dans le SHUa n’est decrit a ce jour. Notre objectif etait ainsi d’analyser l’interaction C3a-RAGE en conditions hemolytiques. Patients/Materiels et methodes Les interactions entre RAGE, l’heme et C3a etaient etudiees en resonance plasmonique de surface (SPR), spectrophotometrie et chromatographie d’exclusion serique. Pour analyser in vivo l’impact de RAGE en conditions hemolytiques, des souris C57Bl/6 RAGE−/− et leurs controles +/ +  littermates recevaient ± une injection intraperitoneale d’heme (50, 100, 200 μmol/kg) avant sacrifice a 16 h. L’expression renale des genes de RAGE et de marqueurs inflammatoires (IL1β, IL6, TNFα) etait etudiee par RTqPCR. Observation/Resultats En SPR, le RAGE recombinant liait la carboxymethyllysine, son principal ligand connu, mais l’interaction RAGE-C3a restait indetectable. A contrario, C3a expose a l’heme liait le RAGE avec une haute affinite. Cette interaction etait donc mediee par l’heme, qui liait RAGE de facon dose-dependante. L’immobilisation des differents domaines de RAGE permettait d’identifier le site de liaison de l’heme sur le domaine V. L’interaction domaine V-heme etait tres affine et specifique, alors que l’heme ne se liait pas aux domaines C1 et C2. Cette liaison etait confirmee en spectroscopie et chromatographie d’exclusion. In vivo, l’injection d’heme a des souris induisait une augmentation dose-dependante de l’expression de RAGE ainsi que l’activation du complement au niveau renal, menant au clivage du C3 et la generation de fragments d’activation du C3 sur l’endothelium glomerulaire. Nous observions egalement une augmentation dose-dependante de l’expression renale des marqueurs de l’inflammation, quantifiee a la condition heme 200 μM/kg autour de × 4, × 200 et × 3,5 pour IL1β, IL6 et TNFα respectivement par rapport au controle (PBS). Les analyses preliminaires montraient une elevation moindre de l’expression de ces genes chez les souris RAGE−/−, dans les memes conditions : × 1,5, × 50 et × 2 respectivement. Discussion/Conclusion Ce travail revele RAGE comme un nouveau recepteur de l’heme. En conditions hemolytiques, les souris RAGE−/− semblent en partie protegees de l’inflammation au niveau renal, ouvrant des perspectives therapeutiques dans les maladies hemolytiques via les molecules anti-RAGE.