miR-376b-3p可促进Runx2诱导C2C12细胞进行成骨细胞早期分化

背景：转录因子Runx2是调节成骨分化及骨发育的关键因子，过表达Runx2可诱导间质细胞C2C12分化为成骨细胞，但相关诱导分化分子机制并不清楚。目的：分析miR－376家族成员在Runx2诱导C2C12细胞进行成骨分化过程中的作用。方法：利用可诱导表达Runx2的细胞系C2C12／Runx2Dox在不同的时间点通过荧光定量PCR方法检测miR－376家族成员表达情况。C2C12／Runx2ox细胞转染miR-376b-3pmimic后利用荧光定量PCR检测成骨细胞标记基因碱性磷酸酶及骨钙素表达情况，并利用碱性磷酸酶染色法分析碱性磷酸酶活性。利用在线工具miRanda，miRWalk与TargetScan共同预测miR－376b-3p潜在靶基因。利用DAVIDBioinformaticsResources数据库对得到的靶基因进行功能聚类分析。结果与结论：在Runx2诱导C2C12进行成骨分化过程中miR-376b－3p表达显著增加，其他成员表达无明显变化。转染miR-376b-3pmimic可上调碱性磷酸酶表达，但对骨钙素表达无影响；转染miR．376b．3pmimic也可增加碱性磷酸酶活性。靶基因功能聚类分析结果表明miR．376b．3p可参与机体骨骼发育过程，表明其在成骨分化过程中的作用。研究结果表明，Runx2通过上调miR．376b－3p的方式对与成骨分化相关基因的表达进行调节，以促进C2C12进行成骨细胞的早期分化。