油酸诱导建鲤 ( Cyprinus carpio var . Jian) 肝细胞脂肪变性模型的建立

通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究，建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型。本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料，加入不同浓度油酸 (0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L) 与肝细胞共培养24–48 h，诱导肝细胞脂肪变性，分别收集不同时段的肝细胞及上清液，采用试剂盒测定肝细胞中甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (TC) 的含量，同时测定上清培养液中谷丙转氨酶 (GPT)、谷草转氨酶 (GOT)、γ-谷氨酰转肽酶 (γ-GT)、乳酸脱氢酶 (LDH) 和超氧化物歧化酶 (SOD) 的活性，MTT法测定肝细胞的存活情况，确定油酸最佳诱导浓度，油红O染色法观察细胞内脂肪滴的形成情况。研究结果显示，0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养48 h，可以显著提高肝细胞内TG、TC含量 ( P P < 0.01)，极显著提高上清培养液中GOT、GPT、LDH、γ-GT的活性，显著降低上清培养液中SOD的活性，但与24 h相比有升高趋势，0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养24 h，光镜下可见细胞内有脂肪滴形成，以48 h最明显。综上所述，油酸浓度0.4 mmol/L、诱导时间48 h成功构建了肝细胞脂肪变性模型，为研究鱼类脂肪肝类疾病奠定了基础。