Production of TNF-alpha by primary cultures of human keratinocytes challenged with loxosceles gaucho venom

Culturas primarias de queratinocitos humanos foram incubadas com veneno de aranha Loxosceles gaucho, que possui atividade esfingomielinase D, responsavel por lesao dermo-necrotica nos acidentes humanos. As celulas das culturas primarias foram agredidas com o veneno em doses crescentes de 10 ng/mL a 2 µg/mL. No sobrenadante das culturas agredidas com 100 ng/mL, 500 ng/mL, 1 e 2 µg/mL da toxina, foi pesquisada a presenca de TNF-a atraves de bioensaio e ELISA. Com 100 ng/mL, foi detectado TNF-a no sobrenadante apos 6 h, no bioensaio; usando o teste de ELISA, detectou-se a citocina no sobrenadante de celulas agredidas com doses de 1 µg/mL, apos 6 e 12 h. Os resultados apontam para a capacidade deste veneno em ativar os queratinocitos em cultura, levando-os a produzir TNF-a. E provavel que a producao de citocinas ative as celulas endoteliais, auxiliando na localizacao do processo inflamatorio.