肠出血型大肠埃希菌O157：H7 Tir基因的原核表达

目的：高效表达出血型大肠埃希菌O157：H7转位紧密黏附素受体Tir（translocation inti min receptor）的C末端蛋白,并初步鉴定其活性。方法 ：对EHEC O157：H7标准株EDL933 Tir完整的编码区基因序列和氨基酸序列进行生物信息学分析,选取C末端基因（命名为Tir-C）,构建原核表达质粒PET-30a（＋）-Tir-C,转至E.coli BL21/DE3中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测相对分子质量,Western blot鉴定免疫原性。结果：PCR扩增出675 bp的目的片段,构建的质粒经酶切鉴定及测序与预期一致。目的蛋白在裂解上清中有表达,纯化浓度达500μg/mL,并有较好的免疫原性。结论：成功表达了有抗原活性的重组Tir-C蛋白,为研究0157：H7疫苗奠定了基础。