Descripción del perfil metabólico de adenomas hipofisarios mediante espectroscopia "ex-vivo", por resonancia magnética de alta resolución con rotación al ángulo mágico

INTRODUCCION La tecnica experimental de espectroscopia ex-vivo, mediante resonancia magnetica de alta resolucion con rotacion al angulo magico, utilizada en el estudio de muestras intactas de tejidos biologicos, ha demostrado ser una herramienta util para la obtencion de datos relevantes acerca de su perfil metabolico. Como ejemplo, su aplicacion al estudio de tumores gliales del sistema nervioso central, se ha trasladado a la clinica diaria y tiene un papel relevante en el manejo y toma de decisiones terapeuticas. Los adenomas hipofisarios son tumores frecuentes, con caracteristicas biologicas que hacen de su diagnostico y manejo una tarea compleja que requiere un abordaje multidisciplinar y cuya caracterizacion histopatologica no aporta en la actualidad una informacion suficiente desde el punto de vista de clasificacion o pronostico. OBJETIVOS El objetivo general del presente estudio es la descripcion del perfil metabolico de adenomas hipofisarios, utilizando la tecnica experimental de RMN-HR-MAS, realizada sobre muestras intactas de tejido, obtenidas quirurgicamente. Se plantea como prueba de concepto, con relacion al potencial de aplicacion de la misma como apoyo al diagnostico y clasificacion de los adenomas hipofisarios. MATERIAL Y METODOS El trabajo se realizo sobre muestras de adenomas hipofisarios que fueron intervenidos por el autor, en el Servicio de Neurocirugia del Hospital Universitario de La Ribera. Se incluyeron 58 muestras intactas de adenomas hipofisarios, con un volumen de tejido tumoral suficiente para la realizacion de la tecnica experimental. Se establecio para cada caso el diagnostico clinico/endocrinologico preoperatorio de tipo de adenoma, utilizando los criterios estandar aceptados internacionalmente. Ademas se recogieron otras variables demograficas, clinicas, radiologicas e histopatologicas. El estudio experimental consistio en la obtencion de espectros HR-MAS. Para todas las muestras se adquirieron un conjunto de espectros 1D: i) PRESAT; ii) CPMG (Carr–Purcell–Meiboom–Gill sequence) y iii) NOESY (nuclear Overhouser effect spectroscopy). Para el grupo de 10 muestras tumorales para las que se disponia de una cantidad de tejido suficiente, tambien se obtuvieron espectros bidimensionales homonucleares 1H-1H TOCSY y heteronucleares 1H-13C HSQC. El analisis estadistico chemometrico incluyo el de componentes principales (PCA) y el analisis discriminante por proyeccion de estructuras latentes (PLS-DA), para el conjunto de datos de los espectros de RMN. RESULTADOS Y DISCUSION El espectro 1D PRESAT de cada una de las muestras incluyo toda su informacion metabolica, con un resolucion y relacion senal/ruido excelentes. El analisis de los espectros bidimensionales permitio identificar un total de 40 metabolitos a partir de la asignacion de 118 resonancias. Una vez identificado el maximo numero de metabolitos, se procedio al analisis estadistico de los espectros 1D PRESAT, de todas las muestras. Los datos se agruparon en el modelo de analisis de componentes principales (PCA) sin condicionamiento previo, apareciendo una buena separacion espontanea entre los tres subtipos de adenomas hipofisarios estudiados para los que se contaba con un numero suficiente de muestras: adenomas no funcionantes, acromegalia y enfermedad de Cushing. En el modelo PLS-DA, la discriminacion fue superior a PCA, ya que se incluyo como informacion adicional el subtipo clinico de adenoma hipofisario, permitiendo identificar tres “regiones” en las que se agruparon preferentemente las muestras correspondientes a cada uno de los subtipos clinicos de adenomas hipofisarios estudiados para los que se contaba con una mayor numero de muestras (adenomas no funcionantes, acromegalia y enfermedad de Cushing). La sensibilidad y especificidad para cada grupo en validacion cruzada fue muy proxima al 90%. Los resultados referidos muestran que, considerando unicamente los resultados del estudio del perfil metabolico de muestras de adenomas hipofisarios, analizadas mediante la tecnica de RMN HR-MAS, se pudieron separar con niveles de especificidad ≥ al 90%, los tres diferentes subtipos clinicos de adenomas hipofisarios para los que se contaba con un numero de muestras suficiente: adenomas no funcionantes, acromegalia y enfermedad de Cushing. CONCLUSIONES El estudio ex-vivo mediante la tecnica HR-MAS de 58 muestras de adenomas hipofisarios, permitio la descripcion de su perfil metabolico no realizada previamente en la literatura, en base a la identificacion de un total de 40 metabolitos a partir de la asignacion de 118 resonancias. Se demostro tambien la existencia de una adecuada correlacion entre perfiles metabolicos y diagnostico clinico, para los tres subtipos de adenomas hipofisarios para los que se conto con un numero de muestras suficiente. Son caracteristicas singulares de la tecnica HR-MAS su rapidez, robustez, objetividad, reproducibilidad y facil automatizacion. Por estos motivos consideramos que este trabajo aporta una base, para poder proponer su futura utilizacion como herramienta adicional en la caracterizacion diagnostica de los adenomas hipofisarios.