Pruebas de virulencia y determinación de actividad extracelular de proteasas tipo subtilisina (Pr1) y tipo tripsina (Pr2) durante la producción de propágulos de aislados de Paecilomyces fumosoroseus de mosquita blanca (Homoptera: Aleyrodidae)

2007 
Resumen Con el objetivo de caracterizar aislamientos para el control biologico de mosquita blanca (Homoptera: Aleyrodidae), se estudiaron tres cultivos monosporicos (CMs) de Paecilomyces fumosoroseus , hongo entomopatogeno de la mosquita blanca (Homoptera: Aleyrodidae). Se determino la virulencia en ninfas de segundo estadio de la mosquita blanca expresada como concentracion letal media (CL 50 ). Se determino la produccion de propagulos fungicos (blastosporas, cuerpos hifales, hifas cortas, conidios sumergidos) en medio liquido, se midio la relacion de largo y ancho de los propagulos, y la actividad proteolitica (total; tipo subtilisina, Pr1 y tipo tripsina, Pr2) simultaneamente con la produccion de propagulos. La proteasa total se determino con azocaseina, y las actividades de Pr1 y Pr2 con N-Succinil-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilida y N-Benzoil-Phe-Val-Arg-p-nitroanilida como sustratos especificos, respectivamente. Se observo variabilidad entre los tres CMs en cuanto a la virulencia, produccion de propagulos y proteasas. Los bioensayos mostraron una CL 50 de 1,1 × 10 3 , 2,5 × 10 4 y 7,6 × 10 4 conidios/ml para los CMs EH-506/3, EH-503/3 y EH-520/3, respectivamente. El CM donde se observo el mayor numero de propagulos en las condiciones ensayadas fue EH-503/3 (7,7 × 10 7 ), luego EH-520/3 con 6,4 × 10 7 y EH-506/3 con 1,0 × 10 7 propagulos/ml. Las actividades enzimaticas de Pr1 y Pr2 se demostraron en los tres CMs. La actividad tipo subtilisina (Pr1) fue mayor en el aislado mas virulento (EH-506/3) con 745,7 UPr1/ml a las 120 h, y senala a Pr1 como un marcador fenotipico de virulencia para P. fumosoroseus . EH-506/3 es un buen candidato para el control biologico de la mosquita blanca en Mexico, por su alta virulencia, elevada concentracion de Pr1 y su rapida transicion a blastosporas en el medio liquido ensayado.
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