Effets cytotoxiques différentiels du glycoside hémi-synthétique (UNBS1450) sur le flux autophagique et la mort cellulaire dans deux lignées de cellules issues des neuroblastomes pédiatriques

Objet Les neuroblastomes (NBs) chez l’enfant developpent une chimioresistance largement due a l’autophagie controlee qui permet d’eliminer les mitochondries endommagees (mitophagie) et de diminuer le stress oxydatif induit par la chimiotherapie [1] . Nous avons explore les effets in vitro d’un glycoside hemi-synthetique (UNBS1450) sur le flux auto (mito) phagique et l’induction de mort cellulaire en deux lignes cellulaires issues de NBs. Methodes Les effets de l’UNBS1450 sur les lignes cellulaires SH-SY5Y et SK-N-AS ont ete etudies par les colorations DAPI, iodure de propidium (mort cellulaire) ; ‹‹ LysotrackerRed ›› (masse lysosomale) et ‹‹ MitotrackerRed ›› (masse mitochondriale). La colocalisation des mitochondries et des autophagosomes ont ete etudiees dans les cellules transfectees avec GFP-LC3 (marqueur des membranes autophagosomales) et colorees par ‹‹ MitotrackerRed ›› et par microscopie electronique a transmission. Ces donnees morphologiques quantitatives obtenues dans l’intervalle 0–24 heures du traitement ont ete correlees avec la dynamique d’activation des caspases 3 et 7, les cathepsines B et L et les derivees actifs d’oxygene. Resultats Dans la lignee SH-SY5Y, l’UNBS1450 a provoque la destabilisation des membranes lysosomales, le retard de la formation des autolysosomes et de l’elimination des mitochondries ; ce retard du flux autophagosomique a eu pour resultat ultime l’apoptose des cellules. Aucun de ces effets sur l’autophagie n’a ete constate dans la lignee SK-N-AS ; toutefois, ces cellules mourraient par necroptose et necrose apres 12–18 heures de traitement. Discussion Nous avons montre 2 effets cytotoxiques distincts du glycoside UNBS1450 : inhibition du flux autophagique et induction de necroptose. Le premier et d’un interet particulier car il suggere la possibilite de subvertir un des mecanismes de la chimioresistance des NBs, la mitophagie controlee, mais le 2 sont nouveaux : teste sur plusieurs types de cellules, l’UNBS1450 a invariablement montre un effet proapoptotique medie par l’inactivation de la proteine Myeloid Cell Leukemia-1 (Mcl-1) [2,3] .