小鼠的克隆着丝粒（SFA）DNA的鉴定

着丝粒是真核染色体上的重要细胞器，是真核染色体作为基因载体行使其遗传功能的关键结构。着丝粒DNA首先是从酵母中分离克隆并被用以构建酵母人工染色体。鉴于真核有丝分裂机制研究和构建高等动物人工染色体研究的需要，从分离和检定过的小鼠着丝粒DNA库中筛选出了6#着丝粒DNA(SFA DNA)，并用荧光原位杂交法(FISH)对其进行了在染色体上的定位检定。用缺口平移法和PCR法分别标记了，SFA DNA和SFA DNA中的小鼠寡份卫星DNA作为探针，分别与小鼠腹水癌细胞和小鼠L929细胞进行原位杂交；并用荧光抗体显示杂交信号的位置。结果，SFA DNA在两种细胞的中期染色体上的杂交信号都位于亚末端的初级缢痕处，表现为单一粗大的斑块。寡份卫星DNA在两种细胞的中期染色体上的杂交信号亦都位于亚末端的初级缢痕处，但极大多数的斑点均表现为成对的细小斑点。初级缢痕正是染色体着丝粒所在的特征性部位。故以上结果说明定位于该部位的克隆的6#SFA DNA，和其中的小鼠寡份卫星DNA都来源于小鼠着丝粒DNA。