特比萘芬对Jukat E6-1细胞株TNFSF7基因表达和启动子甲基化修饰的影响

目的从易诱发药源性红斑狼疮的高危药物中筛选出对CD4＋T淋巴细胞Jukat E6-1细胞株CpG岛甲基化状态和DNA甲基转移酶1（DNMT1）表达有影响的药物,进一步探讨其对自身免疫相关基因TNFSF7（CD70）表达及启动子甲基化修饰的影响。方法分别用不同浓度的特比萘芬、雷尼替丁、奎尼丁和米诺环素处理Jukat E6-1细胞株,并以未用任何浓度药物处理的细胞作为阴性对照（对照组）48 h后收集细胞。5-甲基胞嘧啶抗体和流式细胞术检测细胞CpG岛甲基化水平,定量PCR检测DNMT1和TNFSF7基因mRNA表达水平,流式细胞术检测细胞表面CD70分子表达水平,亚硫酸盐测序法分析TNFSF7基因启动子甲基化水平。结果各浓度药物处理细胞48h后,与对照组相比,特比萘芬组细胞CpG岛甲基化和DNMT1基因mRNA表达水平显著降低（P〈0.05）,其余药物组差异无统计学意义（P〉0.05）。随着特比萘芬浓度的增加,细胞TNFSF7基因mRNA和CD70表达水平也呈增高的趋势,趋势检验有统计学意义（P〈0.01）。进一步研究发现特比萘芬100μmol/L组TNFSF7基因启动子甲基化水平显著低于对照组（P〈0.05）。结论特比萘芬可通过影响DNMT1基因mRNA表达水平,从而使整个基因组CpG岛和TNFSF7基因启动子甲基化水平降低,进而导致细胞CD70表达水平升高,初步揭示了特比萘芬增加自身免疫反应的分子机制。