弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导的KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶基因结构分析

目的对携带blaNDM-1和bl（aKPC-2）的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌（CF-05、CF-17、CF-35、CF-43）,琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析细菌同源性;特异性PCR扩增和序列测定分析碳青霉烯酶耐药基因和ESBLs耐药基因、接合试验、耐药基因周围序列分析对菌株的耐药机制进行分子水平研究。结果 4株细菌仅CF-05对阿米卡星敏感,所有菌株对其他检测药物全部耐药;PFGE结果显示4株细菌不同源;特异性PCR扩增和序列分析显示2株（CF-35、CF-43）同时携带blaNDM-1和blaKPC-2、另2株（CF-05、CF-17）仅携带blaNDM-1,CF-35同时携带bla（CTX-M-15）;其中3株细菌（CF-05、CF-17、CF-43）接合成功,CF-05、CF-17接合子（CF-05-1和CF-17-1）携带blaNDM-1,CF-43获得2种接合子（CF-43-1携带blaKPC-2、CF-43-2同时携带blaNDM-1和blaKPC-2）;分析blaNDM-1和blaKPC-2周围序列发现,4株细菌周围序列分别与国内报道携带blaNDM-1和blaKPC-2的肺炎克雷伯菌质粒pNDM-HN380和PK048周围序列高度相似。结论在4株弗劳地枸橼酸杆菌中检测到NDM-1型碳青霉烯酶,其中2株同时携带KPC-2型碳青霉烯酶,blaNDM-1周围序列和blaKPC-2周围序列与国内已知肺炎克雷伯菌相关耐药基因周围序列高度相似。