miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞“干性”维持中的作用

目的 探讨miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞“干性”维持中的作用及可能机制。 方法 体外培养人结肠癌细胞株HT-29，转染miRNA-302b模拟物（miRNA-302b mimics），同时以未转染组（control）和阴性模拟物转染组（negative control-mimics, NC-mimics）作为对照，采用实时定量反转录聚合酶链反应法（real-time PCR）检测HT-29细胞结肠癌“干性”标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2 mRNA的表达情况；采用蛋白印迹法（Western blot）检测以上“干性”标志蛋白表达的变化；采用克隆形成实验及干细胞成球实验分别观察HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力的变化。 结果 Real-time PCR结果示，miR-302b mimics转染HT-29细胞48 h，“干性”标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2 mRNA表达一致性上调（ P P P 结论 miRNA-302b可通过上调“干性”标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2的表达促进HT-29细胞的克隆形成和细胞球形成能力，从而在结肠癌“干性”维持中发挥重要作用。