Fibrogenèse dans le modèle murin de sclérodermie induite par l’HOCl et effet thérapeutique des cellules souches mésenchymateuses

Introduction Les proprietes immunomodulatrices et antifibrotiques des cellules souches mesenchymateuses sont a l’etude dans diverses pathologies auto-immunes et fibrotiques, et en font une approche prometteuse dans la sclerodermie systemique. Nous avons precedemment montre un effet antifibrotique des cellules souches mesenchymateuses dans le modele murin de sclerodermie induite par l’acide hypochloreux (HOCl) [1] , [2] . Ce modele, base sur le role du stress oxydant dans la sclerodermie, est un modele d’induction de la pathologie, etabli sur 6 semaines. Dans ce travail, nous caracterisons la fibrogenese induite par l’injection repetee d’HOCl, ainsi que l’impact d’une injection intraveineuse de cellules souches mesenchymateuses dans ce processus. Materiels et methodes La sclerodermie systemique est induite chez des souris Balb/c par injections intradermiques quotidiennes d’HOCl pendant 6 semaines. Les souris traitees recoivent une injection intraveineuse a j0 ou j21 de 2,5 × 10 5  cellules souches mesenchymateuses syngeniques d’origine medullaire. L’epaisseur cutanee est mesuree une fois par semaine et le sacrifice est realise apres 3 ou 6 semaines. Les tissus cutanes et pulmonaires sont preleves pour analyse histologique (coloration trichrome de Masson et rouge sirius), immunohistologique (marquages pour a-SMA, TGFb1, CD3, PAX5, F4/80) et moleculaire (expression par RT-PCR en temps reel des collagenes I et III, du TGFβ1, des cytokines IL-1β, TNFα, IL-6 et IL-10). Resultats L’injection quotidienne d’HOCl entraine un epaississement progressif de la peau, semaine apres semaine, bien correle a la quantite de collagene present dans le tissu ( r  = 0,75, p  = 0,001). Cependant, l’analyse histologique et moleculaire des biopsies cutanees montre un processus discontinu, en 2 etapes. Tout d’abord, durant les 3 premieres semaines de l’experience, la peau est le siege d’une infiltration cellulaire transparietale hautement proliferante, maximale a j21 (marquage Ki67+ environ 40 % vs 10 % a j42, p Col1A , Col3 , IL1b et TNFa , en comparaison a j42. L’expression des genes a-sma et Tgfb1  est pour sa part augmentee de maniere stable des j14, et durant toute l’induction de la fibrose. Chez les souris traitees par une injection intraveineuse de 2,5 × 10 5  cellules souches mesenchymateuses avant l’induction de la fibrose (j0), on note un moindre epaississement cutane comparativement au groupe HOCl non traite, avec une difference maximale a j21 ( p p p p Discussion La fibrogenese cutanee consecutive a l’injection quotidienne d’HOCl evolue en deux temps : une phase cellulaire, constituee d’un infiltrat polymorphe inflammatoire (lymphocytes T et macrophages) et myofibroblastique, hautement proliferatif, culminant a mi-experience (j21) ; une seconde phase, ou l’infiltrat cellulaire laisse progressivement place a des depots de collagenes, alors que regresse le tissu adipeux hypodermique. Le traitement systemique de ces souris par des cellules souches mesenchymateuses montre un effet benefique sur les composantes cellulaire et matricielle de la fibrose cutanee. Conclusion L’induction de la sclerodermie murine par injections repetees d’HOCl est temps-dependante, et reproduit une phase inflammatoire proliferante, qui precede une phase de fibrose collagene paucicellulaire. Les cellules souches mesenchymateuses, injectees a ces souris, ont un effet anti-inflammatoire et antifibrotique.