PREDIÇÃO E CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA IN SILICO DE PROVÁVEIS HISTIDINA-QUINASES NO GÊNERO Sporothrix

Introducao: O genero Sporothrix e formado por fungos termodimorficos, dentre ele S. schenckii, S. brasiliensis e S. globosa, causadores da esporotricose. A proteina DRK1, uma histina-quinase, e necessaria para transicao da forma filamentosa para a leveduriforme e a expressao de diversos fatores de virulencia em termodimorficos. Em S. schenckii, uma DRK1 foi descrita, denominada SsDRK1. Entretanto, homologas ainda nao foram descritas em outras especies do genero. Objetivo: Descrever provaveis homologas de SsDRK1, caracterizando alguns de seus aspectos fisico-quimicos Material e metodos: O BLAST Genomes (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) foi utilizado na busca por provaveis homologos do gene de SsDRK1 (numero de acesso JX416706) nos genomas de especies do genero Sporothrix atualmente disponiveis no Genbank (S. brasiliensis, S. globosa, S. insectorum, S. pallida e S. phasma). ORFs e suas provaveis sequencias de aminoacidos foram obtidas pelo ORFfinder (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/). O alinhamento das proteinas obtidas foi realizado atraves do programa BioEdit 7.2.5, assim como a producao de uma matriz de similaridade. As caracteristicas fisico-quimicas foram obtidas atraves do servidor ProtParam (https://web.expasy.org/protparam/). O programa MEMSAT-SVM http://bioinf.cs.ucl.ac.uk/psipred/) foi utilizado para identificar provaveis helices transmembranas. Resultados: Todos os genomas analisados apresentaram provaveis homologas para SsDRK1. Proteinas das especies causadoras da esporotricose tiveram maior similaridade entre si (99,1-99,6%) que com proteinas das demais especies (85,9-96%). Todas as proteinas apresentaram G Box, H Box, D Box e N Box com seus principais residuos conservados, sendo potencialmente ativas. Seus pesos moleculares variavam entre 146,7 e 148,2 kDa e seu pI de 5,43 a 5,69. Todas as proteinas mostraram-se altamente termoestaveis, sendo 91,62 o menor indice alifatico encontrado. Como esperado para histidina-quinases, apresentam sua porcao N-terminal extracelular e C-terminal intracelular, com uma helice transmembrana predita no inicio da G Box. Conclusao: As DRK1 aparentam serem proteinas conservadas no genero Sporothrix, tendo provavelmente atividade similar a vista em outros fungos termodimorficos. Em todos os aspectos analisados, proteinas pertencentes aos agentes etiologicos da esporotricose foram bastante similares entre si. Analises posteriores, como dados do transcriptoma e proteoma, fazem-se necessarios para uma melhor compreensao do papel das DRK1 na reversao em Sporothrix sp.