Comparación de tres métodos de extracción de ADN de tejidos embebidos en parafina

La extraccion de ADN de tejidos embebidos en parafina (TEP) es crucial en muchos estudios moleculares. Varios han sido los protocolos utilizados para conseguir tal proposito. En esta investigacion se compararon tres metodos de extraccion de ADN con la finalidad de seleccionar uno para el trabajo en nuestro laboratorio. Se tomaron diez ganglios linfaticos de diez fallecidos por sida, para su estudio histologico y bacteriologico. El ADN se extrajo por calentamiento a 100 °C (metodo A); con el empleo de resina quelante Chelex-100 (metodo B) y por digestion con proteinasa K (metodo C). Para la identificacion de Mycobacterium tuberculosis se amplifico una region de la secuencia especifica de insercion IS 6110, mediante la reaccion en cadena de la polimerasa. El ADN de los TEP se obtuvo degradado, con diferencias significativas de pureza. Solo se logro amplificacion con los metodos B y C; este ultimo fue el mas laborioso. El metodo que requirio resina quelante Chelex-100 (metodo B) fue el mas util: se obtuvo ADN con calidad y cantidad suficiente en un menor tiempo. Por tanto, este metodo puede ser considerado como una buena opcion en patologia molecular