果糖-1,6-二磷酸酶1过表达抑制他莫昔芬耐药的乳腺癌细胞迁移并促进细胞凋亡

目的探讨过表达果糖-1,6-二磷酸酶1（fructose-1,6-bisphosphatase 1， FBP 1）基因对他莫昔芬耐药性人乳腺癌MCF-7R细胞迁移和凋亡的影响。 方法首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人乳腺癌亲本敏感细胞MCF-7和他莫昔芬耐药细胞MCF-7R中FBP1 mRNA和蛋白的表达水平。然后，采用脂质体转染法将FBP1过表达重组质粒转染至耐药细胞MCF-7R中，再应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测FBP1 mRNA和蛋白的表达水平，以验证FBP1基因过表达效果。接着，倒置光学显微镜下观察FBP1过表达后MCF-7R细胞的形态学变化；FCM法和细胞划痕愈合实验分别检测细胞凋亡及迁移能力的变化；蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax以及上皮-间质转化标志物E-cadherin和vimentin的表达变化。 结果对他莫昔芬耐药的人乳腺癌细胞MCF-7R中FBP1 mRNA和蛋白的表达水平均比其亲本细胞MCF-7明显降低（ P 值均＜0.01）。FBP1过表达重组质粒转染后，MCF-7R细胞中FBP1 mRNA及蛋白的表达水平均明显上调（ P 值均＜0.01），MCF-7R细胞形态由间质细胞样向上皮细胞样转变，细胞凋亡率明显升高（ P ＜0.01），迁移能力则明显降低（ P ＜0.01）。FBP1过表达的MCF-7R细胞中Bcl-2和vimentin蛋白的表达水平明显下降（ P 值均＜0.01），Bax和E-cadherin蛋白的表达水平则明显升高（ P 值均＜0.01）。 结论FBP1基因过表达可明显抑制人乳腺癌他莫昔芬耐药细胞MCF-7R的迁移和上皮-间质转化，并通过下调Bcl-2表达和上调Bax表达来促进肿瘤耐药细胞的凋亡。