Electroforesis bidimensional en orina: una alternativa para el laboratorio clínico

En este trabajo se presenta un metodo confiable para el analisis de rutina de proteinas urinarias. El metodo es la electroforesis bidimensional que combina la electroforesis en acetato de celulosa con la electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio seguida de tincion argentica. La electroforesis bidimensional abre el espectro de proteinas, siendo algunas de ellas identificadas por immunoblotting o espectrometria de masa MALDI. Dichas proteinas son de bajo peso molecular: Orosomucoide (40 kDa), apolipoproteina AI (28 kDa), zinc-alfa 2-glicoproteina (43 kDa), fragmento del perlecan C-terminal LG3 (23 kDa), prostaglandina D2 sintasa tipo-lipocalina (29 kDa) e inter-alfa inhibidor de tripsina cadena pesada H4 (35 kDa). Estas proteinas estan incluidas en estudios de falla renal aguda, falla renal cronica, trasplante renal, enfermedad glomerular y enfermedad maligna del tracto urogenital. El metodo, no invasivo, se aproxima a la tecnologia emergente de la proteomica que permite el analisis simultaneo de varias proteinas urinarias como una herramienta para el diagnostico y monitoreo de una variedad de enfermedades humanas. A method suitable for routine clinical analyses of urinary proteins is presented. This method is a two-dimensional electrophoresis procedure, combining cellulose acetate electrophoresis and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels electrophoresis followed by silver staining. The resulting two-dimensional electrophoresis opened the protein spectrum and some of the latter were identified, by immunoblotting or MALDI mass spectrometry. There are low molecular weight protein: Orosomucoid (40 kDa), apolipoprotein AI (28 kDa), Zinc-alpha2-glycoprotein (43 kDa), C-terminal perlecan fragment LG3 (23 kDa), lipocalin-type prostaglandin D2 synthase (29 kDa) and inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4 (35 kDa). They include studies of acute and chronic kidney injury, renal transplantation, glomerular disease and malignancy of the urogenital tract. This method approaching the emerging proteomic technologies allows simultaneous examination of the patterns of multiple urinary proteins as a powerful non-invasive tool for diagnosis and monitoring of variety of human diseases. Neste trabalho e apresentado um metodo confiavel para a analise de rotina de proteinas urinarias. O metodo e a eletroforese bidimensional que combina a eletroforese em acetato de celulose com a eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil sulfato de sodio seguida de tincao argentea. A eletroforese bidimensional abre o espectro de proteinas, sendo algumas delas identificadas por immunoblotting ou espectrometria de massa MALDI. Tais proteinas sao de baixo peso molecular: Orosomucoide (40 kDa), apolipoproteina AI (28 kDa), zinco-alfa2-glicoproteina (43 kDa), fragmento do perlecan C-terminal LG3 (23 kDa), prostaglandina D2 sintase tipo-lipocalina (29 kDa) e inter-alfa inibidor de tripsina cadeia pesada H4 (35 kDa). Estas proteinas estao incluidas em estudos de falencia renal aguda, falencia renal cronica, transplante renal, doenca glomerular e doenca maligna do trato urogenital. O metodo, nao invasivo, aproxima-se da tecnologia emergente da proteomica que permite a analise simultânea de varias proteinas urinarias como uma ferramenta para o diagnostico e monitoracao de uma variedade de doencas humanas.