鼻咽癌细胞株14—3—3σ启动子去甲基化与基因表达研究

目的研究鼻咽癌细胞株14—3—3σ基因启动子甲基化状况及去甲基化处理对其表达的影响。方法用甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）和逆转录PCR方法检测鼻咽癌细胞株CNEl、CNE2、5—8F、6-10B和非肿瘤人鼻咽上皮细胞NP69细胞14—3—3σ基因启动子甲基化状况和mRNA表达水平。用不同浓度5-杂氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-2dC）处理鼻咽癌细胞株72h，检测处理组和对照组14—3—3σ基因启动子甲基化状况和mRNA表达水平，并用Western—blot检测14—3—3σ蛋白表达情况。结果NP69细胞14—3—3σ启动子未检测到甲基化，CNEl、CNE2、5-8F、6—10B细胞14—3—3σ基因启动子都存在甲基化，4株肿瘤细胞的14—3—3σ mRNA表达水平显著低于NP69细胞。5-aza-2dC处理能剂量依赖性地逆转鼻咽癌细胞14—3—3σ启动子的甲基化状态并上调其mRNA和蛋白质的表达水平，高分化细胞株（CNEl）对药物的敏感性高于低分化细胞株（CNE2、5-8F和6—10B）。结论启动子甲基化是导致鼻咽癌细胞株14—3—3σ mRNA和蛋白质表达降低的直接原因，14—3—3σ启动子去甲基化可能成为鼻咽癌治疗的新靶点。