HIV-1反式激活蛋白-血红素氧合酶-1融合蛋白对大鼠供肝冷保存期肝细胞凋亡的影响

目的探讨HIV-1反式激活蛋白（transactiviting protein，TAT）与血红素氧合酶-1（heme oxygenase，HO-1）融合蛋白（TAT-HO-1）对大鼠供肝冷保存期肝细胞凋亡的影响。方法选择雄性SD大鼠48只，体重250g-300g。根据所用保存液的不同随机分为两组（n=24）：C组，肝脏应用4℃HTK液进行灌注和冷保存；P组，肝脏应用4℃含TAT-HO-150mg／L的HTK液进行灌注和冷保存。参照Kamada等的方法切取肝脏，分别于冷保存0、6、12、18h后，收集保存液，切取肝脏组织。免疫组化染色法分析TAT-HO—1转导入肝脏的情况，全自动生化分析仪测定保存液中谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）水平，放射免疫分析法检测肝组织中透明质酸（hyaluronic acid，HA）水平，TUNEL法检测肝实质细胞和肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cell，SECs）凋亡指数，免疫组化染色法检测肝组织Caspase-3表达情况。结果免疫组化染色结果显示P组肝组织中HO-1含量在冷保存6、12、18h时均高于C组（P〈0．05）。两组保存液中ALT水平，肝组织中HA含量，肝实质细胞和SECs凋亡率以及肝组织Caspase-3表达水平均随保存时间延长而升高（P〈0．05）。冷保存6、12、18h后保存液中ALT水平、肝组织HA含量、肝实质细胞、SECs凋亡指数以及Caspase-3阳性表达水平P组均低于C组（P〈0．05）。结论TAT-HO-1可以在冷保存期间转导进入大鼠肝脏并减轻肝实质细胞和SECs凋亡，对肝脏功能具有一定保护作用。蛋白转导技术将成为减轻肝移植冷保存期损伤的新措施。