缺氧通过HIF-1α介导NRP-1上调抑制破骨细胞分化

目的 研究低氧/HIF-1α通路对RAW264.7细胞向成熟破骨细胞分化的调控作用，并初步探讨其可能的分子机制。 方法 采用短发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)慢病毒感染法，分别建立HIF-1α和NRP-1稳定低表达的RAW264.7细胞系。将RAW264.7细胞分组培养：对照组，分化组(RANKL 100 ng/mL+50%成骨细胞CM)，缺氧组(RANKL 100 ng/mL+50%成骨细胞CM+100 μmol/L CoCl 2 氯化钴)，缺氧+HIF-1α-NC组，缺氧+HIF-1α-shRNA干扰组，缺氧+NRP-1-NC组及缺氧+NRP-1-shRNA干扰组。TRAP染色观察破骨细胞的分化情况；RT-PCR检测Cath K、MMP-9、TRAP、HIF-1α和NRP-1 mRNA的表达；Western blot检测HIF-1α和NRP-1蛋白的表达。 结果 ① 缺氧组破骨细胞分化相关基因Cath K、MMP-9、TRAP mRNA的表达量及TRAP染色阳性细胞数均明显低于分化组( P P P P P P 结论 在RAW264.7细胞中，CoCl 2 诱导的缺氧能够通过上调HIF-1α增强NRP-1的表达，从而抑制其向成熟破骨细胞分化。