Impact de l’aspect du sérum sur le dosage du β (1,3)-D-glucane

Introduction Le β (1,3)-D-glucane est un polysaccharide et composant majeur de la paroi de nombreux champignons. Son dosage dans le serum est un outil complementaire au diagnostic des infections fongiques invasives. Il repose sur une methode colorimetrique. Ainsi, la lipemie, l’ictere ou l’hemolyse d’un echantillon sont sources d’interference analytique et peuvent generer des resultats faussement positifs ou negatifs. Le fournisseur recommande alors de diluer l’echantillon avant dosage afin d’attenuer la coloration des serums due a la presence de molecules de surcharge. Les buts de notre etude ont ete d’objectiver l’impact de l’aspect du serum sur le dosage du glucane et de definir un protocole applicable au laboratoire pour les echantillons icteriques, lipemiques et hemolyses. Materiel et methodes Trente-neuf echantillons seriques ont ete analyses. Il s’agissait de 8 echantillons d’aspect clair, 11 echantillons lipemiques, 8 echantillons icteriques et 12 echantillons hemolyses. Le dosage a ete realise a l’aide du kit Fungitell ® selon les recommandations du fabricant (Associates of Cape Cod, Inc., East Falmouth, MA, Etats-Unis). Le materiel utilise etait « glucan-free ». Chaque echantillon clair a ete teste pur et dilue au 1/2,5, 1/5 et 1/10. Les autres echantillons ont ete testes pur et dilue au 1/10. Les dosages ont ete realises en duplicate. Resultats Le taux de glucane des echantillons clairs etait stable avant et apres dilution, quel que soit le facteur de dilution utilise (coefficient de variation moyen = 14,3 %). La dilution au 1/10 a ete choisie pour la suite de l’etude. Le taux de glucane des 11 echantillons lipemiques et des 8 echantillons icteriques (100 %) etait augmente apres dilution, avec un coefficient d’augmentation moyen de 113,4 % et 109,5 % respectivement. Le taux de glucane de 7 des 12 echantillons hemolyses (58 %) etait aussi augmente apres dilution, avec un coefficient d’augmentation moyen de 195,3 % alors qu’il diminuait pour les 5 restants (42 %) avec un coefficient de diminution moyen de 40,7 %. Conclusion Ce travail a montre une augmentation des taux de glucane apres dilution des echantillons lipemiques ou icteriques suggerant qu’un dosage realise sur echantillon non dilue peut etre a l’origine de resultats faussement negatifs. En revanche, la comparaison des resultats obtenus sur echantillons hemolyses avant et apres dilution a montre des resultats discordants entre echantillons, ne permettant pas d’en deduire l’impact de l’hemolyse sur le resultat. Cette demarche est aujourd’hui appliquee au laboratoire dans la mesure ou tout dosage de glucane sur echantillon lipemique ou icterique est realise apres dilution systematique au 1/10 alors que l’analyse n’est pas effectuee sur echantillon hemolyse.