Avaliação da coluna de imunoafinidade em desenvolvimento para detecção de aflatoxina B1 por espectrofluorimetria.

O monitoramento de aflatoxina B1 depende de metodos analiticos rapidos de alta sensibilidade e especificidade. Considerando que a coluna de imunoafinidade (CIA) e essencial na etapa de limpeza e pre-concentracao do analito, o trabalho objetivou desenvolver CIA empregando IgG anti-AFB1 produzido pelo hibridoma linhagem AF4, imobilizado em suporte gel ativado Affi-Gel 10. A eficiencia de CIA em desenvolvimento foi comparada com CIA comercial perante deteccao de AB1 em milho por espectrofluorimetria (? de excitacao e emissao de 360 e 420 nm, respectivamente). O anticorpo monoclonal (AcM) anti-AFB1 produzido foi semi-purificado (82,18 ?g/mL) e utilizado na confeccao da CIA. Testando a recuperacao de AFB1 em milho artificialmente contaminado com 5, 15 e 30 ng de AFB1/g, a coluna desenvolvida nao foi eficaz (188,67%), se comparado a CIA comercial Aflatest-P (recuperacao de AFB1 de 72,40 a 79,77%). A reutilizacao apos regeneracao de coluna comercial mostrou resultados variaveis, com 34,15 a 82,88% de recuperacao de AFB1, indicando significativo erro na analise. Embora estes sejam dados preliminares, a reducao de solventes toxicos e possibilidade de reutilizacao justificam o desenvolvimento de CIA com melhoria direcionada principalmente ao capeamento, visando obter coluna especifica, capaz de limpar o extrato alimentar em unica etapa cromatografica.