Zur säulenchromatographischen Fraktionierung von Roggenpollenallergenen (Secale cereale)

Zur Reinigung von Roggenpollenextrakten (Secale cereale) wurden saulenchromatographische Untersuchungen durchgefuhrt. Durch stufenweise Erhohung der Ionenstarke lassen sich an DEAE-Zellulose aus dem nicht dialysierbaren Ruckstand des wasrigen Extraktes mehrere Fraktionen gewinnen (Abb. 1). Immunelektrophorese, Immunodiffusion nach Ouchterlony und Polyakrylamid-Gelelektrophorese zeigen jedoch, das diese Fraktionen Antigen- bzw. Proteingemische unterschiedlicher Heterogenitat sind (Abb. 2 und 3, Tabelle 1). Sie lassen sich auch durch Rechromatographie an Sephadex G-100 nicht in homogene Fraktionen trennen. Die meisten Fraktionen zeigen im direkten Intrakutantest an nicht behandelten Roggenpollenallergikern Allergenaktivitat (Tabelle 1). Die Auswahl bestimmter Fraktionen fur eine weitere Trennung ist durch die quantitative Ungenauigkeit des Intrakutantestes erschwert. NDS-gelelektrophoretische Untersuchungen unter Verwendung des Proteinaseinhibitors Phenylmethylsulfonylfluorid weisen auserdem darauf hin (Abb. 4), das in den Roggenpollenextrakten Proteinasen enthalten sind, die sich wahrscheinlich nur schwer von den ubrigen Pollenproteinen trennen lassen und das Proteinmuster verandern. Im Intrakutantest ist jedoch auch nach einjahriger Aufbewahrung der Extrakte keine Veranderung ihrer Allergenpotenz nachweisbar.