光刺激体外培养的NG2细胞对海马神经元内Ca^2＋活性和电活动的影响

目的观察选择性光刺激NG2 细胞对海马神经元内Ca^2＋活性和电活动的影响？并初步探讨可能的作用机制？ 方法体外纯化培养新生SD 大鼠NG2 细胞？通过脂质体转染的方法？在NG2 细胞中特异性表达光敏感通道（channelrhodopsin-2，ChR2）蛋白DNA？并与体外培养7 d 的海马神经元共培养48 h？采用蓝光（470 nm、5 s、5 mW/ cm2）选择性刺激表达ChR2 蛋白的NG2 细胞？利用Ca^2＋成像和电生理的方法记录NG2 细胞周围海马神经元中的Ca^2＋浓度变化和电流改变情况？同时比较加入/ 未加入γ-氨基丁酸A 型受体抑制剂情况下神经元的电流变化特点？ 结果当蓝光刺激表达ChR2 蛋白的NG2 细胞后？首先NG2 细胞内的Ca2＋ 信号增强？随后其周围海马神经元内的Ca2＋ 升高约20%-Ca^2＋ 缓慢下降后再次出现一个Ca^2＋ 峰？幅度较第1 次小？NG2 细胞周围海马神经元的电流频率增加？振幅增大？ 而当预先在细胞外液中加入50 μmol/ L γ-氨基丁酸A 受体抑制剂后？海马神经元的电流频率和振幅较未加抑制剂组明显减小（P〈0.05）？ 结论选择性光刺激表达ChR2 蛋白的NG2 细胞可使其兴奋？且可能通过释放γ-氨基丁酸来调节神经元活动。